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Good's緩沖液——MES

MES的全稱(chēng)是2-嗎啉乙磺酸,是一種人工合成的兩性離子緩沖劑。它在1966年由諾曼·古德(Norman Good)團(tuán)隊(duì)開(kāi)發(fā),屬于著名的“Good's緩沖劑”家族,是生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用且重要的pH緩沖劑之一。作為“Good's緩沖劑”家族的一員,MES擁有一系列優(yōu)越特性: ① 理想的pKa值:MES的pKa值在25°C時(shí)為6.15。根據(jù)緩沖理論,緩沖液在其pKa值±1的范圍內(nèi)最有效。因此,MES的理想緩沖范圍是pH 5.5 - 6.7。這個(gè)范圍恰好覆蓋了許多生物化學(xué)反應(yīng)的關(guān)鍵pH。 ② 生物相容性好:對(duì)酶活性、細(xì)胞代謝干擾小;細(xì)胞毒性小,常用于細(xì)胞培養(yǎng)和蛋白質(zhì)研究。 ③ 化學(xué)惰性:不參與或干擾大多數(shù)生化反應(yīng);不會(huì)與必需的二價(jià)陽(yáng)離子(如Mg²?、Ca²?)強(qiáng)烈結(jié)合,而這對(duì)于許多酶(如ATP相關(guān)酶)的活性至關(guān)重要。 ④ 高水溶性:在水中溶解度很高,可以方便地配制高濃度儲(chǔ)備液(如1M)。 ⑤ 低紫外吸收:在波長(zhǎng)大于260nm時(shí)吸光度很低,不會(huì)干擾核酸或蛋白質(zhì)的紫外分光光度法檢測(cè)。 ⑥ 熱穩(wěn)定性好:在高溫下相對(duì)穩(wěn)定。鑒于MES優(yōu)越的理化性質(zhì),與其他常用緩沖液成分相比具有以下顯著優(yōu)勢(shì)。 MES vs. PBS(磷酸鹽緩沖液) PBS在pH 7.0-7.4范圍緩沖能力強(qiáng),但會(huì)與鈣、鎂離子結(jié)合,并可能抑制某些酶活性。MES則沒(méi)有這些問(wèn)題,且可以在更酸的pH下工作。 MES vs. Tris Tris的pKa為8.07,是堿性pH范圍的經(jīng)典緩沖劑。而MES是酸性至中性范圍的補(bǔ)充。Tris對(duì)溫度敏感,且可能在某些反應(yīng)中作為活性基團(tuán)參與。 MES vs. HEPES HEPES的pKa為7.55,是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的中性緩沖劑之一。MES則可以在更酸的pH范圍內(nèi)作為HEPES的補(bǔ)充。 綜合上述優(yōu)勢(shì)特點(diǎn),MES在生命科學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域都有廣泛應(yīng)用: 蛋白質(zhì)電泳與純化:SDS-PAGE(蛋白凝膠電泳)/層析色譜。 細(xì)胞生物學(xué):用于配制培養(yǎng)基或灌流液,維持細(xì)胞外環(huán)境的pH穩(wěn)定。 細(xì)胞器分離:在亞細(xì)胞組分分離的勻漿和離心介質(zhì)中提供緩沖環(huán)境。 生物化學(xué)與酶學(xué):為酶活性測(cè)定、酶動(dòng)力學(xué)研究提供穩(wěn)定的pH環(huán)境。分子生物學(xué):Northern Blot(RNA印跡)/某些核酸雜交和檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中作為緩沖成分。 綜上所述,MES是一款性能卓越、應(yīng)用廣泛的緩沖劑。其核心價(jià)值在于能夠提供一個(gè)pH值為5.5 - 6.7的弱酸性生理范圍的穩(wěn)定、惰性且廣泛兼容的化學(xué)環(huán)境,以確保生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)的順利開(kāi)展。 作為全球多家知名培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)和制藥企業(yè)長(zhǎng)期固定供應(yīng)商,PanReac AppliChem憑借其卓越的產(chǎn)品品質(zhì)和嚴(yán)格的質(zhì)量把控,為科研人員和制藥企業(yè)提供了值得信賴(lài)的MES。 貨號(hào) 中文名稱(chēng) 英文名稱(chēng) CAS A0689 2-嗎啉乙磺酸 MES anhydrous BioChemica 4432-31-9 PanReac AppliChem是來(lái)自歐洲的品質(zhì)優(yōu)良的生物化學(xué)試劑與制藥原料生產(chǎn)商之一,擁有百年歷史,已通過(guò)多項(xiàng)ISO質(zhì)量體系認(rèn)證,是全球生命科學(xué)研究、知名CRO/CDMO企業(yè)、大型制藥、診斷、食品、化妝品等工業(yè)企業(yè)的重要供應(yīng)商。作為全球多家知名培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)和制藥企業(yè)長(zhǎng)期固定供應(yīng)商,PanReac AppliChem是全球?yàn)閿?shù)不多的能提供眾多藥典級(jí)與細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)原料的生產(chǎn)企業(yè),全面提供細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)、藥典級(jí)、生化級(jí)、超純級(jí)等化學(xué)品,包括培養(yǎng)基組分如氨基酸、維生素、抗生素、鹽類(lèi)、緩沖液、穩(wěn)定劑、表面活性劑等和制藥工藝中常用化學(xué)品如Tris、鳥(niǎo)苷、腺嘌呤、辛酸鈉、DMSO、葡聚糖等。 西美杰是PanReac AppliChem中國(guó)總代理,為用戶(hù)提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。如對(duì)產(chǎn)品感興趣歡迎撥打西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006或登錄網(wǎng)站www.rmb365.cn了解更多信息。 更多>

新品推薦 | SISPROT?蛋白質(zhì)組學(xué)樣本前處理試劑盒

蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)的樣本前處理環(huán)節(jié),是確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性和一致性的關(guān)鍵步驟??紤]到樣本前處理流程復(fù)雜和步驟繁多,開(kāi)發(fā)一套集成化、標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)流程,對(duì)于解決蛋白質(zhì)組學(xué)樣本前處理的痛點(diǎn)至關(guān)重要。貝普奧生物公司在2023年推出的SISPROT®技術(shù)是一種基于離心移液槍頭“Spintip”的集成式蛋白質(zhì)組學(xué)前處理技術(shù),可實(shí)現(xiàn)從原始樣品出發(fā)一站式完成蛋白質(zhì)組學(xué)樣品前處理所有步驟,包括蛋白質(zhì)樣本的預(yù)富集、還原、烷基化、酶解和除鹽等,處理后的樣品可直接用于色譜質(zhì)譜檢測(cè)。該技術(shù)兼具高靈敏度、高通量及高穩(wěn)定性的特點(diǎn),尤其適用于低微克甚至納克的蛋白質(zhì)樣品。產(chǎn)品特點(diǎn)高效率:全程2小時(shí)完成樣品處理傳統(tǒng)方法需要16小時(shí),SISPROT試劑盒可實(shí)現(xiàn)2小時(shí)內(nèi)完成樣品前處理所有步驟,處理后的樣品可直接上機(jī)檢測(cè)。高靈敏度:100ng可檢測(cè)到約6000種蛋白質(zhì)100ng可以穩(wěn)定檢測(cè)到約6000種蛋白質(zhì)。最低樣本初始量可低至或1ng(相當(dāng)于10個(gè)細(xì)胞)。高穩(wěn)定性:不同人操作均可獲得良好的定量穩(wěn)定性熱銷(xiāo)產(chǎn)品SISPROT® SE 只需500ng起始蛋白量就可以穩(wěn)定鑒定7000+種蛋白質(zhì),解決低豐度蛋白質(zhì)檢測(cè)困難的問(wèn)題。操作簡(jiǎn)便,重復(fù)性?xún)?yōu)異,適用血液、體液、細(xì)胞以及外泌體等樣本蛋白質(zhì)組樣本前處理,可應(yīng)用于血液樣本人群大隊(duì)列及疾病分子分型研究、高通量篩選藥物靶點(diǎn)、空間蛋白質(zhì)組等領(lǐng)域。SISPROT® Flex  常規(guī)樣本一次操作僅需要1-10μg的蛋白,節(jié)約樣本的使用量,兼容SDS裂解液,適用于植物組織、動(dòng)物組織、細(xì)胞、血漿、血清、唾液、尿液、腦脊液、蛋白溶液等樣本,可應(yīng)用于生物機(jī)制探究、診斷技術(shù)開(kāi)發(fā)、治療策略研究等醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。產(chǎn)品信息產(chǎn)品名稱(chēng)貨號(hào)規(guī)格SISPROT® SE質(zhì)譜系統(tǒng)蛋白樣本預(yù)處理試劑盒BO-008-9696T/盒BO-008-2424T/盒BO-008-066T/盒SISPROT® FLEX質(zhì)譜系統(tǒng)蛋白樣本預(yù)處理試劑盒BO-012-2424T/盒BO-012-066T/盒相關(guān)文獻(xiàn)? Simple and integrated spintip-based technology applied for deep proteome profiling, Anal. Chem., 2016, 88(9):4864-71. ? 3D-SISPROT: A simple and integrated spintip-based protein digestion and three-dimensional peptide fractionation technology for deep proteome profiling, J. Chromatogr. A, 2017, 1498:207-214. ? Mixed-mode ion exchange-based integrated proteomics technology for fast and deep plasma proteome profiling, J. Chromatogr. A, 2018, 1564:76-84.深圳市貝普奧生物科技有限公司是一家于專(zhuān)注于蛋白質(zhì)組學(xué)研發(fā)型高科技公司,以蛋白質(zhì)組學(xué)前處理系列產(chǎn)品為切入點(diǎn),通過(guò)臨床功能蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)平臺(tái)為目標(biāo)市場(chǎng)提供全流程解決方案。公司專(zhuān)注于降低蛋白質(zhì)組學(xué)分析技術(shù)難度,提升其在創(chuàng)新標(biāo)志物和創(chuàng)新藥物研發(fā)全鏈條中的應(yīng)用,以蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)為重大疾病提供精準(zhǔn)診療策略。北京西美杰科技有限公司作為貝普奧在中國(guó)總代理,與國(guó)內(nèi)眾多知名藥企,CRO/CMO企業(yè)建立了長(zhǎng)久穩(wěn)定的合作關(guān)系。多年來(lái)西美杰的產(chǎn)品及服務(wù)幫助許多企業(yè)加速R&D階段,提高藥物質(zhì)量、純度和安全,加速優(yōu)化研發(fā)工藝,縮短產(chǎn)品上市時(shí)間,降低QC成本。如您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,歡迎致電西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006或者登陸網(wǎng)站www.rmb365.cn了解更多信息。 更多>

賦能過(guò)敏原精準(zhǔn)診斷:Anti-Human IgE (epsilon) Antibody

在過(guò)敏原特異性IgE檢測(cè)試劑研發(fā)中,核心原料抗人IgE抗體的品質(zhì)直接決定了試劑的性能。檢測(cè)血清中特異性IgE水平是體外診斷過(guò)敏疾病的“金標(biāo)準(zhǔn)”,而IgE與其他免疫球蛋白(如IgG、IgA、IgM)結(jié)構(gòu)相似,均由重鏈和輕鏈組成。其類(lèi)別由重鏈恒定區(qū)唯一決定:IgE為ε鏈,IgG為γ鏈,IgA為α鏈,IgM為μ鏈。 許多普通抗人IgE抗體因靶向公共表位或輕鏈,易與其他免疫球蛋白發(fā)生交叉反應(yīng),影響特異性。而KPL抗人IgE (ε鏈) 抗體精準(zhǔn)靶向IgE分子獨(dú)有的ε重鏈恒定區(qū),確保了抗體具有高特異性、低背景信號(hào)與優(yōu)異的檢測(cè)準(zhǔn)確度,為高性能試劑開(kāi)發(fā)提供了可靠保障。KPL抗人IgE (ε鏈) 抗體憑借其高特異性與通用性,成為過(guò)敏檢測(cè)領(lǐng)域的核心工具。它能精準(zhǔn)識(shí)別人IgE分子共有的Fc段(ε鏈),不受過(guò)敏原種類(lèi)(如塵螨、花粉或食物類(lèi)過(guò)敏原)的影響,實(shí)現(xiàn)對(duì)各類(lèi)特異性IgE的統(tǒng)一檢測(cè),可高效適配于單項(xiàng)或混合型過(guò)敏原檢測(cè)體系。同時(shí),因KPL抗人IgE (ε鏈) 抗體具備很高的靈敏度與特異性,能穩(wěn)定結(jié)合IgE,有效避免與IgG、IgA等其他免疫球蛋白的交叉反應(yīng),確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。目前,該抗體已廣泛應(yīng)用于過(guò)敏原特異性檢測(cè)、IgE相關(guān)疾病的體外診斷及研究中。 KPL抗人IgE (ε鏈) 抗體適用的診斷技術(shù)平臺(tái): ELISA/化學(xué)發(fā)光:作為核心檢測(cè)抗體,構(gòu)建高靈敏度夾心法檢測(cè)體系。 側(cè)流免疫分析:作為標(biāo)記抗體,助力POCT產(chǎn)品開(kāi)發(fā)。 免疫印跡:用于確認(rèn)特定蛋白激發(fā)的IgE反應(yīng)。 流式細(xì)胞術(shù):用于分析B細(xì)胞表面的IgE表達(dá)。 KPL抗人IgE (ε鏈) 抗體產(chǎn)品優(yōu)勢(shì): 高特異性:精準(zhǔn)靶向人IgE的Fc段(ε鏈),與IgG、IgA等免疫球蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。 通用性強(qiáng):適用于不同過(guò)敏原類(lèi)型,可適配于單項(xiàng)或混合型過(guò)敏原檢測(cè)體系。 平臺(tái)兼容:適用于ELISA、化學(xué)發(fā)光、免疫印跡等多種免疫技術(shù)平臺(tái)。 多種標(biāo)記:包含未標(biāo)記、酶標(biāo)記、生物素標(biāo)記和熒光標(biāo)記抗體。 貨號(hào) 產(chǎn)品名稱(chēng) 規(guī)格 標(biāo)記物 5210-0158 Anti-Human IgE (epsilon) Antibody 1.0mg / 5220-0329 Anti-Human IgE (epsilon) Antibody, Peroxidase-Labeled 1.0mg HRP 5220-0350 Anti-Human IgE (epsilon) Antibody, ReserveAP?-Labeled 1.0mg AP 5230-0287 Anti-Human IgE (epsilon) Antibody, FITC-Labeled 0.5mg FITC 5260-0030 Biotinylated Anti-Human IgE (epsilon) Antibody 0.5mg Biotin KPL的抗人IgE二抗系列產(chǎn)品,以其卓越性能和豐富選擇,成為免疫學(xué)研究及過(guò)敏原診斷試劑開(kāi)發(fā)的首選產(chǎn)品?;诎邢騃gE的ε鏈核心設(shè)計(jì),KPL為化學(xué)發(fā)光、酶聯(lián)免疫、免疫印跡及快速檢測(cè)平臺(tái)等提供可靠解決方案,助力科研與診斷工作順利開(kāi)展。 KPL(Kinetic Plasmonics Laboratories)是一家在生物科學(xué)領(lǐng)域具有深厚歷史和卓越聲譽(yù)的公司。作為世界上較早實(shí)現(xiàn)親和純化二抗商業(yè)化的生物公司之一,KPL憑借其在該領(lǐng)域的先驅(qū)地位奠定了堅(jiān)實(shí)的發(fā)展基礎(chǔ)。此外,KPL也是世界上較大的二抗和底物顯色系統(tǒng)生產(chǎn)商,擁有近40年的產(chǎn)品研發(fā)經(jīng)驗(yàn),積累了豐富的專(zhuān)業(yè)知識(shí)和技術(shù)實(shí)力。公司通過(guò)ISO13485質(zhì)量體系認(rèn)證,確保所有產(chǎn)品的批間差小,品質(zhì)可靠。KPL的產(chǎn)品以高純度、高靈敏度和高信噪比(信號(hào)強(qiáng)、背景低)為特點(diǎn),深受科研人員和診斷企業(yè)的信賴(lài)。2013年,KPL被體外診斷試劑供應(yīng)商SeraCare收購(gòu),進(jìn)一步鞏固了其在行業(yè)內(nèi)的領(lǐng)先地位。SeraCare成立于1984年,是全球體外診斷制造商和臨床實(shí)驗(yàn)室的主要合作伙伴,2018年成為L(zhǎng)GC集團(tuán)的一部分。 北京西美杰作為L(zhǎng)GC·Seracare·KPL品牌的中國(guó)區(qū)總代理,致力于KPL優(yōu)秀產(chǎn)品的中國(guó)推廣,為國(guó)內(nèi)的廣大科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和專(zhuān)業(yè)的服務(wù)。若對(duì)產(chǎn)品感興趣歡迎致電西美杰全國(guó)客服熱線(xiàn)400-050-4006或者登陸官方網(wǎng)站www.rmb365.cn了解更多信息。 更多>

Mirus全能型轉(zhuǎn)染試劑:TransIT-X2?應(yīng)對(duì)多種核酸/蛋白及細(xì)胞類(lèi)型

基于需要遞轉(zhuǎn)不同種類(lèi)核酸/蛋白類(lèi)型研究,在細(xì)胞轉(zhuǎn)染環(huán)節(jié),研究者們常碰到如下三類(lèi)問(wèn)題:細(xì)胞對(duì)化學(xué)試劑較為敏感,轉(zhuǎn)染后,細(xì)胞活率下降或死亡;研究常用細(xì)胞類(lèi)型較多,不同類(lèi)型細(xì)胞,轉(zhuǎn)染效率差異較大,導(dǎo)致單個(gè)轉(zhuǎn)染試劑或者實(shí)驗(yàn)流程,無(wú)法滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)需求;遞轉(zhuǎn)多種類(lèi)型核酸或蛋白,需要挑選對(duì)應(yīng)的轉(zhuǎn)染試劑,并且需要大量實(shí)驗(yàn)優(yōu)化,才可以得到較高的轉(zhuǎn)染效率。有沒(méi)有一款化學(xué)轉(zhuǎn)染試劑,可以同時(shí)應(yīng)對(duì)常規(guī)到難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類(lèi)型,有著較低的細(xì)胞毒性,并且適用于多種核酸/蛋白類(lèi)型遞轉(zhuǎn)呢?兼具多重功能、高性能的TransIT-X2®轉(zhuǎn)染試劑,可同時(shí)應(yīng)對(duì)常見(jiàn)細(xì)胞及難轉(zhuǎn)染細(xì)胞類(lèi)型,避免條件摸索和大量的重復(fù)性實(shí)驗(yàn),輕松得到您理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。已驗(yàn)證在大多數(shù)細(xì)胞類(lèi)型中(如貼壁/懸浮細(xì)胞、原代細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等),都有著優(yōu)異的轉(zhuǎn)染效率、低毒性(特別相對(duì)于形成脂質(zhì)體復(fù)合物的Lipofectamine®系列試劑)、高性能的表現(xiàn);適用于多種研究領(lǐng)域,包括但不限于干細(xì)胞研究、基因編輯CRISPR研究、RNAi基因干擾/沉默、穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建、低毒性的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)、共轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)等;允許高效且穩(wěn)定的同時(shí)遞轉(zhuǎn)多種核酸/蛋白類(lèi)型,包括但不限于質(zhì)粒 DNA、siRNA/miRNA 和 CRISPR/Cas9 組分。為什么Mirus TransIT-X2® Dynamic Delivery System有著如此高性能及廣泛適應(yīng)性呢?這歸因于Mirus強(qiáng)大且高效的專(zhuān)利遞轉(zhuǎn)平臺(tái)設(shè)計(jì),可進(jìn)行多重、多功能組合的轉(zhuǎn)染試劑組分篩選并優(yōu)化。成立于1995年的Mirus,專(zhuān)注及深耕核酸遞轉(zhuǎn)領(lǐng)域多年(圖1),從最早具有低毒性的TransIT ® -LT1到GMP級(jí)別、可用于A(yíng)AV和LV生產(chǎn)的TransIT-VirusGEN®,都是基于該遞轉(zhuǎn)平臺(tái)進(jìn)行設(shè)計(jì)及開(kāi)發(fā)的。截至目前,使用Mirus產(chǎn)品發(fā)表文章已超過(guò)1萬(wàn)篇,并且發(fā)表文章及Mirus數(shù)據(jù)庫(kù)涵蓋了超過(guò)1200種細(xì)胞類(lèi)型,更多文章及數(shù)據(jù)查詢(xún),請(qǐng)點(diǎn)擊這里。圖1 Mirus產(chǎn)品年鑒不同于傳統(tǒng)基于單組分的轉(zhuǎn)染試劑(如陽(yáng)離子聚合物或陽(yáng)離子脂質(zhì)體),為了進(jìn)一步提高轉(zhuǎn)染效率,以應(yīng)對(duì)不同細(xì)胞類(lèi)型或特定的應(yīng)用。Mirus將專(zhuān)利的多聚物(Polymer)及脂質(zhì)(Lipids)技術(shù)進(jìn)行多重組合,在不形成脂質(zhì)體復(fù)合物(即liposome,通常具有細(xì)胞毒性)前提條件下,得到多種類(lèi)、高性能的轉(zhuǎn)染方案,克服細(xì)胞遞轉(zhuǎn)過(guò)程中的多重阻礙,以實(shí)現(xiàn)更高效轉(zhuǎn)染和更低的細(xì)胞毒性(圖2)。圖2 Mirus轉(zhuǎn)染試劑原理示意圖基于上述Mirus強(qiáng)大、高效的專(zhuān)利遞轉(zhuǎn)平臺(tái)設(shè)計(jì),在進(jìn)行多重、多組合篩選、優(yōu)化及后續(xù)驗(yàn)證,獨(dú)有的智能迭代設(shè)計(jì)流程,優(yōu)化轉(zhuǎn)染技術(shù)中的每個(gè)組分(圖3)。Mirus推出一系列經(jīng)典轉(zhuǎn)染試劑,以應(yīng)對(duì)多種需求:廣譜、高性能、低毒性的轉(zhuǎn)染試劑家族: TransIT-X2®、TransIT®-LT1、TransIT®-2020針對(duì)特定細(xì)胞類(lèi)型的轉(zhuǎn)染試劑家族:TransIT®-293、TransIT®-BrCa、TransIT®-CHO、TransIT-HeLaMONSTER®、TransIT®-Insect、TransIT®-Jurkat、TransIT®-Keratinocyte針對(duì)特定應(yīng)用的轉(zhuǎn)染試劑家族:-      病毒生產(chǎn):VirusGEN® 轉(zhuǎn)染試劑及配套試劑盒、TransIT®-Lenti-      蛋白/抗體生產(chǎn):TransIT-PRO®、CHOgro® Expression System、CHOgro® High Yield Expression System寡核苷酸遞轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)染家族:TransIT®-Oligo、TransIT-siQUEST®、TransIT-TKO®mRNA及長(zhǎng)鏈RNA遞轉(zhuǎn):TransIT®-mRNA圖3 Mirus獨(dú)有智能迭代設(shè)計(jì),轉(zhuǎn)染試劑優(yōu)化流程示意圖Mirus TransIT-X2®轉(zhuǎn)染試劑性能數(shù)據(jù)展示Mirus TransIT-X2®Dynamic Delivery System遞轉(zhuǎn)表達(dá)EGFP質(zhì)粒DNA分別至A549、CHO-K1、Hep G2、MDCK、LNCaP、PC-12、原代人乳腺上皮細(xì)胞(HMEC)和正常人真皮成纖維細(xì)胞(NHDF)細(xì)胞中。實(shí)驗(yàn)使用96孔板, TransIT-X2®試劑加入量為0.2-0.4µl,DNA加入量為0.1µg(使用試劑:DNA=2:1、3:1或4:1)。轉(zhuǎn)染后48小時(shí),使用Guava® easyCyte? 5HT流式細(xì)胞儀重復(fù)檢測(cè)三次,評(píng)估轉(zhuǎn)染效率。圖4 TransIT-X2®在包括原代細(xì)胞在內(nèi)的多種細(xì)胞類(lèi)型中都具有較高轉(zhuǎn)染效率使用TransIT-X2®(Mirus Bio)、Lipofectamine®2000 (Thermo Fisher Scientific)或Lipofectamine®3000 (Thermo Fisher Scientific)轉(zhuǎn)染熒光素酶編碼質(zhì)粒DNA至A549 (A)或MDCK (B)細(xì)胞中,轉(zhuǎn)染24小時(shí),通過(guò)熒光素酶活性評(píng)估轉(zhuǎn)染效率,定量受損細(xì)胞中釋放的LDH評(píng)估細(xì)胞毒性。與Lipofectamine®2000或Lipofectamine®3000的細(xì)胞相比,在最佳試劑:DNA比例下,Trans - x2®有著更高的熒光強(qiáng)度及更低的細(xì)胞毒性。圖5 相較于使用單一組分且形成陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合物(liposome)的Lipofectamine®系列轉(zhuǎn)染試劑,TransIT-X2®有著更高的轉(zhuǎn)染效率及更低細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)Tips: 針對(duì)更多特定細(xì)胞類(lèi)型,試劑使用建議,詳細(xì)請(qǐng)見(jiàn):Cell-type specific transfection protocol recommendations (PDF).Mirus TransIT-X2®在RNAi干擾實(shí)驗(yàn)中性能數(shù)據(jù)展示基因沉默相關(guān)功能研究在分子和細(xì)胞生物學(xué)中發(fā)揮著重要作用,化學(xué)轉(zhuǎn)染也在該研究領(lǐng)域扮演者重要角色。常見(jiàn)參與RNAi干擾途徑的天然RNA分子包括:-      小干擾 RNA (Small interfering RNAs, siRNA) :由雙鏈 RNA(dsRNA)斷裂所產(chǎn)生的短雙鏈 RNA(20-25bp);-      微小 RNA(MicroRNAs, miRNAs) :非編碼 RNA 處理后所產(chǎn)生的一類(lèi)短的、單鏈 RNA(20-22nt)。利用 RNAi 抑制基因表達(dá)的另一種方法為短發(fā)夾 RNA(short hairpin RNA , shRNA),這些短 RNA 序列可通過(guò)病毒或非病毒載體方式進(jìn)行表達(dá),更多詳細(xì)信息可查閱Mirus Applications | RNAi Gene Silencing。圖6  不同RNAi干擾途徑示意圖TransIT-X2®Dynamic Delivery System和Lipofectamine®2000轉(zhuǎn)染試劑用于轉(zhuǎn)染siRNA(靶點(diǎn)為內(nèi)源性蛋白質(zhì)- GAPDH和AHA1),對(duì)照使用正常人類(lèi)真皮成纖維細(xì)胞(NHDF)遞轉(zhuǎn)非靶向siRNA。Trans IT-X2®加入量為4µl, Lipofectamine®2000加入量為6µl,siRNA加入量都為25 nM。使用qRT-PCR相對(duì)于18s rRNA水平測(cè)量GAPDH或AHA1 mRNA進(jìn)行檢測(cè),轉(zhuǎn)染后48小時(shí)均一化至非靶向?qū)φ战M的mRNA水平,誤差則為三次復(fù)孔實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)差。圖7  基于siRNA核酸遞轉(zhuǎn)類(lèi)型的基因沉默研究,相比Lipofectamine® 2000,TransIT-X2®有著更高的基因沉默效率TransIT-X2®Dynamic Delivery System和Lipofectamine®2000轉(zhuǎn)染試劑用于轉(zhuǎn)染Pre-miR? hsa-miR-1 miRNA Precursor 或者mirVana? miRNA mimic, miR-1 (兩者都已驗(yàn)證,可降低PTK9 mRNA表達(dá)水平)。Pre-miR?陰性質(zhì)控用于評(píng)估m(xù)RNA表達(dá)水平基線(xiàn)值。Trans IT-X2®及Lipofectamine®2000試劑加入量都為3µl, 加入50 nM miRNA。使用qRT-PCR相對(duì)于18s rRNA水平,經(jīng)過(guò)陰性質(zhì)控的均一化,得到PTK9 mRNA表達(dá)水平值。圖8  基于miRNA (miRNA Precursor及miRNA mimic)基因沉默研究,相比Lipofectamine® 2000,TransIT-X2®有著更高的基因沉默效率Mirus TransIT-X2®在CRISPR基因編輯實(shí)驗(yàn)中性能數(shù)據(jù)展示經(jīng)過(guò)改造及優(yōu)化的細(xì)菌 CRISPR/Cas9 系統(tǒng),已被廣泛應(yīng)用到哺乳細(xì)胞的基因編輯中。基于CRISPR基因編輯實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)兩組分:Cas9蛋白及引導(dǎo)RNA(gRNA)。當(dāng)Cas9蛋白切割了靶向基因組DNA,會(huì)觸發(fā)兩種內(nèi)源性修復(fù)機(jī)制,即非同源末端連接(NHEJ)和同源定向修復(fù)(HDR),以應(yīng)對(duì)細(xì)胞中產(chǎn)生的DNA斷裂?;贜HEJ細(xì)胞修復(fù)通路,為非精準(zhǔn)、且容易出錯(cuò)細(xì)胞修復(fù)通路,可引入導(dǎo)致基因功能缺失的Indel。基于HDR的細(xì)胞修復(fù)通路,則需要額外的同源 DNA 作為修復(fù)模板,從而實(shí)現(xiàn)“精準(zhǔn)”修復(fù),在目的基因插入特定的基因或長(zhǎng)片段序列。根據(jù)研究者們不同的實(shí)驗(yàn)需求,CRISPR基因編輯可以有多種類(lèi)型實(shí)驗(yàn)設(shè)置,這意味需要面對(duì)不同核酸類(lèi)型的轉(zhuǎn)染甚至共轉(zhuǎn)染,舉例如下:1.      質(zhì)粒pDNA轉(zhuǎn)染作為CRIPSR實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵兩組分:Cas9蛋白及gRNA,可以設(shè)計(jì)單個(gè)質(zhì)粒DNA,共同表達(dá)兩組分(A);或者使用兩質(zhì)粒系統(tǒng),其中一個(gè)質(zhì)粒表達(dá)Cas9蛋白,另外一個(gè)質(zhì)粒表達(dá)gRNA(B);當(dāng)使用Cas9切口酶(Nickase),則需要兩條gRNA,這時(shí)可能需要三質(zhì)粒系統(tǒng)的遞轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)。2.      質(zhì)粒DNA及RNA寡核苷酸共轉(zhuǎn)染此時(shí),與上述實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)不同的是,gRNA以寡核苷酸形式進(jìn)行遞轉(zhuǎn),這就意味著遞轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)需要同時(shí)轉(zhuǎn)染質(zhì)粒DNA以及RNA寡核苷酸(A和B)。3.      mRNA及RNA寡核苷酸共轉(zhuǎn)染為了避免由于質(zhì)粒DNA基因組整合而導(dǎo)致的脫靶效應(yīng),可以共轉(zhuǎn)染編碼Cas9蛋白的mRNA及gRNA (RNA寡核苷酸)。4.      Cas9/gRNA RNP復(fù)合物遞轉(zhuǎn)隨著Cas9蛋白及gRNA商品化趨于成熟,越來(lái)越多的研究者們選擇直接從第三方購(gòu)買(mǎi)高保真Cas9蛋白,以及有著額外化學(xué)修飾且在細(xì)胞內(nèi)更穩(wěn)定的gRNA寡核苷酸。除了極大的縮短和簡(jiǎn)化CRISPR實(shí)驗(yàn)流程外,相對(duì)于質(zhì)?;蛘適RNA方式合成,直接遞轉(zhuǎn)RNP復(fù)合物的方式有著更高的特異性及編輯效率。實(shí)驗(yàn)Tips: 針對(duì)上述不同CRISPR實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及遞轉(zhuǎn)情形,TransIT-X2® Dynamic Delivery System經(jīng)優(yōu)化的具體實(shí)驗(yàn)說(shuō)明, 下載鏈接如下:TransIT-X2® for CRISPR Plasmid + gRNA Delivery (PDF) TransIT-X2® for CRISPR Plasmid Delivery (PDF) TransIT-X2® for CRISPR RNP + ssODN Delivery (PDF) TransIT-X2® for CRISPR RNP Delivery (PDF)使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System  (2 µl/孔,24孔板, Mirus Bio)共轉(zhuǎn)染0.5 µg質(zhì)粒DNA(表達(dá)Cas9蛋白)及50nM 2-part gRNA (PPIB基因)至HEK293T/17, U2OS 及NHDF細(xì)胞中,轉(zhuǎn)染后48小時(shí),T7E1驗(yàn)證切割效率。圖9 質(zhì)粒DNA和gRNA寡核苷酸共轉(zhuǎn)染:TransIT-X2®分別在293T/17、U2OS和NHDF細(xì)胞中共轉(zhuǎn)Cas9質(zhì)粒DNA與gRNA(RNA寡核苷酸),都有著較高的基因編輯效率(18-48%)2-part gRNA (PPIB基因,IDT) 及Cas9 蛋白(PNA Bio)形成RNP復(fù)合體,分別使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System(1 µl/孔, Mirus Bio)、Lipofectamine® CRISPRMAX? (1.5 µl/孔, ThermoFisher) 、Lipofectamine® RNAiMAX (1.5 µl/孔, ThermoFisher) 、Lipofectamine® 3000 (1.5 µl/孔ThermoFisher) 遞轉(zhuǎn)至293T/17及U2OS細(xì)胞中。測(cè)試gRNA兩種使用量(6 nM或12 nM),相同Cas9 蛋白加入量(6 nM),轉(zhuǎn)染后48小時(shí),T7E1驗(yàn)證切割效率。圖10 Cas9/gRNA RNP復(fù)合體遞轉(zhuǎn):相較于Lipofectamine®系列轉(zhuǎn)染試劑,TransIT-X2®有著更高的切割效率Mirus TransIT-X2®產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)?新型基于多組分開(kāi)發(fā)的廣譜型轉(zhuǎn)染試劑(適用于多種細(xì)胞,包括難轉(zhuǎn)細(xì)胞);? 可同時(shí)轉(zhuǎn)染核酸及蛋白,包括不限于DNA,siRNA/miRNA和CRISPR/Cas9復(fù)合物;?不形成脂質(zhì)體復(fù)合物,降低細(xì)胞毒性;? 滿(mǎn)足多種應(yīng)用:基因過(guò)表達(dá)、基因沉默、基因編輯、干細(xì)胞研究、穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建等。相關(guān)產(chǎn)品信息產(chǎn)品名稱(chēng)規(guī)格貨號(hào)TransIT-X2® Dynamic Delivery System1 × 0.3 mlMIR 60031 × 0.75 mlMIR 60041 × 1.5 mlMIR 60005 × 1.5 mlMIR 600510 × 1.5 mlMIR 6006文末福利:關(guān)注西美杰微信公眾號(hào)“xmjsci”,回復(fù)關(guān)鍵詞“X2試用”,填寫(xiě)信息即有機(jī)會(huì)免費(fèi)獲取100μl TransIT-X2®轉(zhuǎn)染試劑試用裝。試用成功后還可享優(yōu)惠折扣購(gòu)買(mǎi)TransIT-X2®正裝哦,快來(lái)試用搶購(gòu)吧!美國(guó)Mirus公司成立于1995年,是世界上很早開(kāi)發(fā)高效、低毒轉(zhuǎn)染試劑的公司,同時(shí)也是目前該類(lèi)試劑主要的供應(yīng)商之一。Mirus被公認(rèn)為轉(zhuǎn)染試劑開(kāi)發(fā)的領(lǐng)跑者,其許多杰出成果獲得世界公認(rèn)與廣大用戶(hù)的好評(píng)。北京西美杰科技有限公司是Mirus中國(guó)區(qū)代理,始終秉承著專(zhuān)業(yè)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度為客戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。如果您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,歡迎致電北京西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006或登錄網(wǎng)站www.rmb365.cn了解更多產(chǎn)品信息。 更多>

Cygnus CHO 6xLipase? MS Assay——精準(zhǔn)量化風(fēng)險(xiǎn),明確工藝優(yōu)化方向

在生物藥生產(chǎn)過(guò)程中,宿主細(xì)胞蛋白(HCP)殘留是影響藥物穩(wěn)定性的關(guān)鍵因素之一。其中,脂肪酶類(lèi)HCP由于可能降解制劑中常用的表面活性劑(如吐溫-80/20)成為HCP殘留中的重點(diǎn)關(guān)注對(duì)象。吐溫降解會(huì)導(dǎo)致藥物溶液中游離脂肪酸增多,可能引起蛋白聚集、形成脂肪酸-蛋白復(fù)合物顆粒,進(jìn)而影響產(chǎn)品的安全性與有效性。 ELISA HCP檢測(cè)方法雖能評(píng)估總體HCP水平,但無(wú)法識(shí)別具體種類(lèi)的脂肪酶,難以對(duì)工藝相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行精準(zhǔn)評(píng)估。為解決這一問(wèn)題,Cygnus Technologies開(kāi)發(fā)了基于液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)的靶向蛋白質(zhì)組學(xué)分析方法(CHO 6xLipase? MS Assay)。該方法采用平行反應(yīng)監(jiān)測(cè)(PRM)技術(shù)和穩(wěn)定同位素標(biāo)記肽段(SIL),實(shí)現(xiàn)對(duì)可以引起吐溫降解的六種CHO來(lái)源HCP脂肪酶的絕對(duì)定量: HCP 蛋白 LOD (ppm) 定量范圍(ppm) 溶酶體酸性脂肪酶(LAL) 0.15 18.25 - 292.06 脂蛋白脂肪酶(LPL) 0.08 0.10 - 323.34 磷脂酶A1(PLA1) 0.12 0.49 - 311.67 XV組溶酶體磷脂酶A2(GXVPA2) 0.03 4.72 - 302.31 磷脂酶B樣蛋白2(PLBL2) 0.56 0.66 - 419.46 磷酸肌醇磷脂酶C(PIPLC) 0.09 13.91 - 890.07 技術(shù)路線(xiàn)圖 技術(shù)優(yōu)勢(shì): 藥典方法:PRM結(jié)合SIL肽段是USP 1132.1>指南認(rèn)可的絕對(duì)定量方法,準(zhǔn)確度和精密度遠(yuǎn)超半定量方法 卓越線(xiàn)性范圍:所有6種脂肪酶R²均≥0.98,定量范圍覆蓋0.1-890 ppm,滿(mǎn)足從早期工藝到終產(chǎn)品的全階段檢測(cè)需求 嚴(yán)格驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn):準(zhǔn)確度誤差 案例分享 客戶(hù)1:高風(fēng)險(xiǎn)樣品(DS-top):Fc融合蛋白 ?      Tween20降解(3個(gè)月內(nèi)完全降解) ?      檢出5種脂肪酶,多個(gè)酶協(xié)同加速吐溫降解 蛋白 預(yù)測(cè)濃度(ng/mL) %CV GXVP_A2 1.15 5.2% LAL 2.76 9.6% LPL 6.94 2.3% PIPL_C NA PL_A1 0.23 3,2% PLBL2 12.4 客戶(hù)2 :穩(wěn)定樣品(DS-bottom):?jiǎn)慰寺】贵w ?      未檢測(cè)到Tween20降解 ?      僅檢出PLBL2(3.06 ng/mL),其余5種均低于檢出限 蛋白 預(yù)測(cè)濃度(ng/mL) %CV GXVP_A2 NA LAL NA LPL NA PIPL_C NA PL_A1 NA PLBL2 3.06 3.20% 服務(wù)方案: 標(biāo)準(zhǔn)服務(wù)周期:6周左右(從樣品接收到出報(bào)告) 加急服務(wù):4周或2周可選(需額外收取費(fèi)用) 樣品需求:通過(guò)BCA法定量1 mL DS樣品(濃度≥4 mg/ml) 如果您對(duì)脂肪酶殘留檢測(cè)服務(wù)感興趣,歡迎點(diǎn)擊這里填寫(xiě)信息,西美杰會(huì)第一時(shí)間聯(lián)系您分享更多詳細(xì)內(nèi)容。 Cygnus Technologies, LLC.為生物技術(shù)和生物制藥行業(yè)提供產(chǎn)品和分析方法,旨在加速研發(fā)階段和提高產(chǎn)品質(zhì)量。Cygnus開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)的生物工藝殘留試劑盒,用于檢測(cè)超過(guò)50種不同表達(dá)系統(tǒng)的特異性雜質(zhì)。Cygnus作為專(zhuān)注于生物技術(shù)應(yīng)用免疫檢測(cè)的高靈敏度分析技術(shù)的專(zhuān)家,Cygnus的產(chǎn)品和服務(wù)已經(jīng)被幾乎所有主要的生物制藥公司使用超過(guò)25年。 北京西美杰科技有限公司作為Cygnus在中國(guó)總代理,與國(guó)內(nèi)眾多知名藥企,CRO/CMO企業(yè)建立了長(zhǎng)久穩(wěn)定的合作關(guān)系。多年來(lái)西美杰的產(chǎn)品及服務(wù)幫助許多企業(yè)加速R&D階段,提高藥物質(zhì)量、純度和安全,加速優(yōu)化研發(fā)工藝,減少產(chǎn)品上市時(shí)間,降低QC成本。如您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,歡迎致電西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006或者登陸網(wǎng)站www.rmb365.cn了解更多信息。 更多>

【戰(zhàn)略合作】西美杰攜手Synthego帶來(lái)先進(jìn)的CRISPR技術(shù)解決方案

CRISPR是“Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats”的縮寫(xiě),是細(xì)菌和古菌的一種適應(yīng)性免疫機(jī)制。該系統(tǒng)由Cas核酸酶和引導(dǎo)RNA(gRNA)組成,最初用于識(shí)別和切斷病毒DNA來(lái)幫助細(xì)菌抵御病毒,現(xiàn)已被改造為基因編輯工具。自2012年Doudna博士和Charpentier博士發(fā)現(xiàn)天然CRISPR-Cas9系統(tǒng)介導(dǎo)DNA切割的分子機(jī)制后,隨著全球科研人員的持續(xù)探索與優(yōu)化,該技術(shù)已逐步演變?yōu)橐环N高度精準(zhǔn)且廣泛應(yīng)用的基因組編輯平臺(tái)。目前,CRISPR技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于基因編輯、RNA編輯、堿基編輯、診斷和活體成像等多個(gè)領(lǐng)域。它已用于包括人類(lèi)在內(nèi)的多種生物的基因改造,推動(dòng)了科研與臨床的發(fā)展。 CRISPR要實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)的基因編輯,gRNA的設(shè)計(jì)與Cas核酸酶的選擇是至關(guān)重要的兩大因素。gRNA的選擇將很大程度上取決于研究所需的編輯類(lèi)型,比如基因敲除(KO)、基因敲入(KI)、堿基編輯、先導(dǎo)編輯、CRISPRi或CRISPRa等。Synthego的CRISPR設(shè)計(jì)工具是面向全球所有研究人員的免費(fèi)資源,它能夠幫助用戶(hù)設(shè)計(jì)并挑選出最優(yōu)gRNA序列,從而能夠針對(duì)超過(guò)12萬(wàn)個(gè)基因中的任何一個(gè)進(jìn)行靶向操作。另外,選擇合適的Cas酶對(duì)于實(shí)驗(yàn)的成功也至關(guān)重要。Cas9最初是從鏈球菌(SpCas9)中分離而來(lái),是最早且最常用的Cas酶。然而,現(xiàn)在有許多不同的天然Cas酶和基因工程改造的Cas酶可供不同用途使用。例如,經(jīng)過(guò)改造后的Cas9缺口酶被用于制造單鏈斷裂,而經(jīng)過(guò)改造后的高保真Cas9可以顯著減少脫靶現(xiàn)象,另外還有天然的Cas13則在診斷領(lǐng)域擁有更大的應(yīng)用潛力。 在推動(dòng)基于CRISPR技術(shù)應(yīng)用與發(fā)展方面,Synthego不僅是前沿的CRISPR解決方案集成化供應(yīng)的領(lǐng)先企業(yè),更是致力于科技創(chuàng)新與客戶(hù)成功的長(zhǎng)期戰(zhàn)略伙伴。其產(chǎn)品包括CRISPR基因編輯所需的所有關(guān)鍵原料,包括gRNA的設(shè)計(jì)與合成,各種天然和改造基因編輯酶,并提供從研究級(jí)、臨床級(jí)到GMP級(jí)別的強(qiáng)大產(chǎn)品組合。Synthego的CRISPR解決方案可以為研究人員提供從研究到臨床轉(zhuǎn)化各個(gè)階段的有力支持。 用于臨床前研發(fā)的Research-grade產(chǎn)品體系 在Synthego的產(chǎn)品體系中,研究級(jí)產(chǎn)品處于核心地位,專(zhuān)為支持早期臨床前研究而設(shè)計(jì),更重要的是,所有研究級(jí)產(chǎn)品均采用與GMP級(jí)產(chǎn)品一致的嚴(yán)格質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果具備高度可靠性與可重復(fù)性。Synthego的研究級(jí)gRNA已廣泛應(yīng)用于全球領(lǐng)先的學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)、生物技術(shù)公司及制藥研發(fā)企業(yè),被公認(rèn)為CRISPR合成領(lǐng)域的行業(yè)標(biāo)桿,使Synthego成為業(yè)內(nèi)少數(shù)能夠提供具備臨床嚴(yán)謹(jǐn)性特征的研究工具的企業(yè)之一。 INDe解決方案助力臨床早期的優(yōu)化 在早期臨床前研究與監(jiān)管合規(guī)之間架起橋梁,往往是開(kāi)發(fā)CRISPR療法過(guò)程中最具挑戰(zhàn)性的環(huán)節(jié)之一,這一階段常常是基因編輯療法開(kāi)發(fā)的瓶頸,可能會(huì)導(dǎo)致項(xiàng)目進(jìn)度延遲甚至停滯。Synthego的INDe解決方案專(zhuān)為應(yīng)對(duì)這一關(guān)鍵階段而設(shè)計(jì),提供經(jīng)濟(jì)實(shí)惠、規(guī)模適中且兼具質(zhì)量控制與定制化,以滿(mǎn)足臨床前優(yōu)化的需求。Synthego的INDe gRNA可幫助用戶(hù)驗(yàn)證候選藥物、優(yōu)化流程,并為臨床生產(chǎn)奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。 Synthego INDe 解決方案 "GMP-like"工藝 INDe gRNA包含批次記錄、可追溯性和驗(yàn)證等文件,可支持IND申報(bào)和臨床早期試驗(yàn),同時(shí)相比真正的GMP更加節(jié)約成本,確保資源的充分利用。INDe的應(yīng)用將有助于順利過(guò)渡到GMP級(jí)生產(chǎn),從而減少重新驗(yàn)證相關(guān)的時(shí)間和成本。 “GMP-like”工藝往往缺少滿(mǎn)足申報(bào)所需的文件記錄、質(zhì)量監(jiān)督和全面控制。這常常導(dǎo)致產(chǎn)品變異性大且追溯性不足,從而可能延誤監(jiān)管審批,并影響產(chǎn)品的安全性和有效性。 應(yīng)用于臨床試驗(yàn)的GMP級(jí)產(chǎn)品 Synthego提供的GMP級(jí)gRNA與核酸酶產(chǎn)品嚴(yán)格遵循GMP標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行開(kāi)發(fā),專(zhuān)為滿(mǎn)足IND申報(bào)以及臨床應(yīng)用所要求的高精度標(biāo)準(zhǔn)而設(shè)計(jì)??蛻?hù)可依托Synthego先進(jìn)的生產(chǎn)平臺(tái),確保其研發(fā)流程符合全球最嚴(yán)格的監(jiān)管規(guī)范。截至目前,Synthego已成功支持超過(guò)12項(xiàng)CRISPR基因編輯療法的IND申報(bào),在行業(yè)內(nèi)建立了高度可信的品牌聲譽(yù)。其持續(xù)穩(wěn)定的GMP級(jí)產(chǎn)品供應(yīng)能力,充分體現(xiàn)了Synthego致力于推動(dòng)以臨床療效為導(dǎo)向的基因編輯技術(shù)革新的長(zhǎng)期承諾。 Synthego是一家專(zhuān)注于CRISPR技術(shù)解決方案的領(lǐng)先企業(yè),致力于加速生命科學(xué)領(lǐng)域的研究與開(kāi)發(fā)進(jìn)程,推動(dòng)人類(lèi)健康水平的持續(xù)提升。作為生物技術(shù)行業(yè)的先鋒,Synthego憑借前沿的CRISPR技術(shù)積累與專(zhuān)業(yè)能力,積極突破細(xì)胞治療與基因療法的研發(fā)瓶頸。公司使命在于提供業(yè)界領(lǐng)先的規(guī)?;?、高性能CRISPR解決方案,全面提升從基礎(chǔ)科研到臨床轉(zhuǎn)化的研究效率。通過(guò)簡(jiǎn)化的授權(quán)機(jī)制,以及由行業(yè)專(zhuān)家團(tuán)隊(duì)提供的全方位技術(shù)支持與監(jiān)管咨詢(xún)服務(wù),Synthego致力于降低技術(shù)應(yīng)用門(mén)檻,促進(jìn)CRISPR技術(shù)的廣泛可及性,從而助力改善患者治療結(jié)局。Synthego的技術(shù)成果已被數(shù)百項(xiàng)經(jīng)同行評(píng)審的研究文獻(xiàn)引用,并廣泛應(yīng)用于全球數(shù)千名學(xué)術(shù)界與產(chǎn)業(yè)界研究人員及藥物開(kāi)發(fā)機(jī)構(gòu)。憑借在基因組編輯領(lǐng)域?qū)崿F(xiàn)的大規(guī)模標(biāo)準(zhǔn)化能力,Synthego始終處于科技創(chuàng)新前沿,為下一代創(chuàng)新藥物的研發(fā)提供關(guān)鍵支撐。 北京西美杰科技有限公司是Synthego中國(guó)一級(jí)代理,始終秉承著專(zhuān)業(yè)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度為客戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。如您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣歡迎撥打西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006或登錄網(wǎng)站www.rmb365.cn了解更多信息。 更多>

HCP ELISA方法學(xué)驗(yàn)證——精密度與重復(fù)性(Precision & Reproducibility)

當(dāng)我們已經(jīng)驗(yàn)證過(guò)HCP ELISA與樣品基質(zhì)的兼容性,并且找到了樣品的最低需求稀釋度(MRD)后,那么下一步就是驗(yàn)證ELISA方法的精密度,進(jìn)而完成法規(guī)要求的ELISA方法學(xué)驗(yàn)證的全部流程。 什么是精密度和重復(fù)性? 精密度是指多次檢測(cè)結(jié)果之間的一致性程度,通常以實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性進(jìn)行評(píng)估,以變異系數(shù)(%CV)來(lái)表示。 計(jì)算公式:%CV=(標(biāo)準(zhǔn)差/平均濃度)×100% 通過(guò)此公式,可以評(píng)估兩種精密度: 批內(nèi)精密度:衡量單次實(shí)驗(yàn)內(nèi)不同復(fù)孔之間的重復(fù)性。嚴(yán)格的批內(nèi)CV表明樣品讀數(shù)不受加樣位置或操作程序的影響。 批間精密度:衡量多次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)之間的重復(fù)性。確保批間CV在可接受范圍內(nèi)(通常<15-20%,取決于法規(guī)要求)是證明該方法能持續(xù)穩(wěn)定產(chǎn)出可靠結(jié)果的關(guān)鍵指標(biāo)。 法規(guī)要求 ? ICH Q2(R1) 方法:在3個(gè)濃度水平下至少進(jìn)行9次測(cè)定,覆蓋該測(cè)定的分析范圍(在3個(gè)濃度下進(jìn)行3次重復(fù)) 標(biāo)準(zhǔn):未說(shuō)明。 ? US FDA 方法:至少在3個(gè)濃度水平下進(jìn)行5次測(cè)定,覆蓋該測(cè)定的分析范圍(在3個(gè)濃度下進(jìn)行5次重復(fù)) 標(biāo)準(zhǔn):每個(gè)濃度水平下精密度的CV%應(yīng)在±20%范圍內(nèi),LLOQ的CV%不應(yīng)超過(guò)25%。 ? EMA 方法:在4種濃度下至少進(jìn)行5次測(cè)定(在LLOQ、LLOQ的三倍以?xún)?nèi)、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)濃度的30-50%、ULOQ的至少75%,4種濃度下進(jìn)行5次重復(fù))。 標(biāo)準(zhǔn):每一濃度水平質(zhì)控的批內(nèi)和批間精密度均不應(yīng)超過(guò)15%,LLOQ的CV%不應(yīng)超過(guò)20%。 常見(jiàn)問(wèn)題排查:導(dǎo)致CV值偏高的原因 如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果的CV值高于試劑盒說(shuō)明書(shū)中的預(yù)期范圍,那么很可能是操作流程或設(shè)備出現(xiàn)了問(wèn)題,我們建議您按以下步驟進(jìn)行問(wèn)題排查與實(shí)驗(yàn)優(yōu)化。 洗板操作 問(wèn)題原因: 過(guò)度劇烈的洗板是CV值異常偏高的常見(jiàn)原因,包括使用自動(dòng)洗板機(jī)、用力拍板等操作,因其可能導(dǎo)致抗原-抗體復(fù)合物發(fā)生非特異性解離,進(jìn)而造成CV值過(guò)高。 優(yōu)化建議: 為實(shí)現(xiàn)最佳重復(fù)性,我們強(qiáng)烈推薦洗瓶洗板法,可以通過(guò)交替方向加入洗液來(lái)確保每個(gè)孔的清洗時(shí)間保持基本一致。有關(guān)洗板的詳細(xì)操作請(qǐng)參考下文。 如何用正確的洗板方法解決ELISA檢測(cè)結(jié)果漂移的問(wèn)題? 酶標(biāo)儀性能 問(wèn)題原因: 當(dāng)在低吸光度范圍(如OD值<0.1)的檢測(cè)值出現(xiàn)較大波動(dòng)時(shí),可能提示酶標(biāo)儀存在潛在問(wèn)題。光源、單色器或?yàn)V光片的故障可能導(dǎo)致間歇性信號(hào)異?;蛟肼?,此類(lèi)問(wèn)題通常無(wú)法通過(guò)常規(guī)校準(zhǔn)程序識(shí)別,但會(huì)對(duì)檢測(cè)的靈敏度以及定量限(LOQ)和檢測(cè)限(LOD)產(chǎn)生顯著影響。該類(lèi)問(wèn)題常表現(xiàn)為在空白孔或僅含有非吸附性液體的孔中,孔與孔之間OD值讀數(shù)標(biāo)準(zhǔn)偏差達(dá)到0.020或更低。 優(yōu)化建議: 對(duì)于HRP-TMB顯色的ELISA,推薦使用雙波長(zhǎng)讀數(shù)(如檢測(cè)波長(zhǎng)450nm,參比波長(zhǎng)650nm)。通過(guò)雙波長(zhǎng)讀數(shù)法,可從檢測(cè)波長(zhǎng)(如450nm)處的信號(hào)值中扣除非特異性信號(hào)(如650nm處的背景OD值),從而提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。該方法可以最大限度地減少因污漬或塑料缺陷引起的孔間差異,從而提升精密度與準(zhǔn)確度。 (注:質(zhì)量良好的板條在參比波長(zhǎng)(如650nm)的OD值通常很低(平均約0.040),且孔間OD值標(biāo)準(zhǔn)差極?。s0.002)。若實(shí)際檢測(cè)OD值遠(yuǎn)高于0.040且標(biāo)準(zhǔn)差大于0.004,則表明酶標(biāo)儀可能存在問(wèn)題。) 試劑污染 問(wèn)題原因: Cygnus的ELISA試劑盒靈敏度高達(dá)pg/mL至ng/mL級(jí)別,實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中潛在的高濃度分析物(如培養(yǎng)基、上游工藝樣品中的HCP或BSA,濃度可達(dá)mg/mL級(jí)),非常容易對(duì)試劑盒中的關(guān)鍵組分造成污染,如果檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)孔板中個(gè)別孔吸光值偏差過(guò)大,且同一個(gè)試劑盒重復(fù)后偏差數(shù)據(jù)值相似,則可能是孔板的孔、標(biāo)準(zhǔn)品或酶標(biāo)抗體出現(xiàn)了污染。 優(yōu)化建議: 盡可能在遠(yuǎn)離處理上游樣品的區(qū)域內(nèi)進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)操作,避免交叉使用移液器,做好操作臺(tái)面與儀器的清潔,盡可能使用帶有濾芯的吸頭等。 分析人員與儀器 問(wèn)題原因: 操作不規(guī)范,移液器未校準(zhǔn)或使用質(zhì)量不達(dá)標(biāo)的吸頭,均可能對(duì)檢測(cè)結(jié)果的精密度產(chǎn)生不利影響。 優(yōu)化建議: 邀請(qǐng)另一位分析人員在獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室中使用不同設(shè)備進(jìn)行平行測(cè)試,可能有助于您確定精密度不理想的原因是由于操作人員缺乏經(jīng)驗(yàn),還是常規(guī)實(shí)驗(yàn)室工具存在問(wèn)題,比如移液器未校準(zhǔn)或吸頭質(zhì)量差。 成功完成ELISA方法的精密度與重復(fù)性驗(yàn)證,是確保數(shù)據(jù)可靠、推動(dòng)項(xiàng)目前進(jìn)的基石。Cygnus針對(duì)每一種檢測(cè)試劑盒均提供相應(yīng)的QS(Qualification Summary)文件,如有需求歡迎點(diǎn)擊這里填寫(xiě)信息索取,或直接聯(lián)系Cygnus中國(guó)總代理西美杰。如您在使用Cygnus HCP ELISA試劑盒的過(guò)程中遇到任何問(wèn)題,我們的技術(shù)支持團(tuán)隊(duì)將竭誠(chéng)為您提供解決方案和建議。 Cygnus Technologies專(zhuān)注為生物技術(shù)和生物制藥行業(yè)提供產(chǎn)品和分析方法超過(guò)25年,旨在加速研發(fā)階段和提高產(chǎn)品質(zhì)量。Cygnus開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)的生物工藝殘留試劑盒,用于檢測(cè)超過(guò)50種不同表達(dá)系統(tǒng)的特異性雜質(zhì)。Cygnus作為專(zhuān)注于生物技術(shù)應(yīng)用免疫檢測(cè)的高靈敏度分析技術(shù)的專(zhuān)家,其產(chǎn)品和服務(wù)已經(jīng)被全球超過(guò)95%以上生物制藥公司使用,并獲得FDA、NMPA、EMA等監(jiān)管機(jī)構(gòu)的廣泛認(rèn)可。 北京西美杰科技有限公司作為Cygnus在中國(guó)總代理,與國(guó)內(nèi)眾多知名藥企,CRO/CMO企業(yè)建立了長(zhǎng)久穩(wěn)定的合作關(guān)系。多年來(lái)西美杰的產(chǎn)品及服務(wù)幫助許多企業(yè)加速R&D階段,提高藥物質(zhì)量、純度和安全,加速優(yōu)化研發(fā)工藝,減少產(chǎn)品上市時(shí)間,降低QC成本。如您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,歡迎致電西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006或者登陸網(wǎng)站www.rmb365.cn了解更多信息。 更多>

星品推薦 | Cas9蛋白檢測(cè)試劑盒

CRISPR與Cas蛋白共同構(gòu)成原核生物的適應(yīng)性免疫系統(tǒng),現(xiàn)已被開(kāi)發(fā)為可實(shí)現(xiàn)DNA或RNA精準(zhǔn)編輯的分子工具。其中,Cas9蛋白(CRISPR相關(guān)蛋白9)因其能夠介導(dǎo)DNA的定點(diǎn)雙鏈斷裂而受到廣泛關(guān)注,成為基因組編輯中應(yīng)用最廣泛的核心工具。在多種模式生物中,該系統(tǒng)誘導(dǎo)的DNA雙鏈斷裂可通過(guò)非同源末端連接(NHEJ)途徑導(dǎo)致插入或缺失突變,從而實(shí)現(xiàn)基因失活;或通過(guò)同源重組(HR)途徑實(shí)現(xiàn)外源基因的靶向插入。在人類(lèi)細(xì)胞中,CRISPR/Cas9系統(tǒng)已成功應(yīng)用于基因敲除與基因替換,為治療由基因突變引發(fā)的遺傳性疾病提供了新的策略。隨著基因編輯技術(shù)的不斷優(yōu)化與應(yīng)用場(chǎng)景的拓展,Cas9在基因治療、農(nóng)業(yè)育種及生物制藥等領(lǐng)域展現(xiàn)出廣闊前景,將在未來(lái)生命科學(xué)研究與實(shí)際應(yīng)用中發(fā)揮關(guān)鍵作用。CRISPR/Cas9基因編輯為支持Cas9相關(guān)研究,西美杰代理的Cell Biolabs品牌提供兩種Cas9檢測(cè)試劑盒:Cas9活性檢測(cè)試劑盒用于評(píng)估細(xì)胞裂解物中Cas9酶的活性;Cas9 ELISA試劑盒則可在96孔板中對(duì)Cas9蛋白進(jìn)行定量檢測(cè)。這兩種試劑盒均可有效檢測(cè)來(lái)源于金黃色葡萄球菌(S. aureus)和化膿性鏈球菌(S. pyogenes)的Cas9蛋白。Cas9活性檢測(cè)試劑盒采用酶促反應(yīng)方法檢測(cè)細(xì)胞裂解物中的Cas9蛋白活性。貨號(hào)品名規(guī)格靈敏度PRB-5203SaCas9 Activity Assay Kit (S. aureus)20 assays4 µg/mLPRB-5206SpCas9 Activity Assay Kit (S. pyogenes)20 assays10 µg/mLCas9 ELISA檢測(cè)試劑盒采用酶聯(lián)免疫方法檢測(cè)細(xì)胞和組織樣本中的Cas9蛋白含量。貨號(hào)品名規(guī)格靈敏度PRB-5204SaCas9 ELISA Kit (S. aureus) 96 assays3.9 ng/mLPRB-5079SpCas9 ELISA Kit (S. pyogenes)96 assays1.5 ng/mLCell Biolabs公司坐落于美國(guó)加利福尼亞州圣地亞哥市,一直致力于開(kāi)發(fā)生命科學(xué)研究領(lǐng)域的技術(shù)和工具,并將所開(kāi)發(fā)的創(chuàng)新性技術(shù)成果商業(yè)化。Cell Biolabs孜孜不倦的完善產(chǎn)品,以期使細(xì)胞功能和疾病機(jī)制研究達(dá)到新高度。Cell Biolabs公司的產(chǎn)品獨(dú)具特色并且處于行業(yè)前沿水平,全球眾多大學(xué)、政府研究機(jī)構(gòu)、生物、制藥企業(yè)的科研實(shí)驗(yàn)室均在使用。北京西美杰是Cell Biolabs品牌中國(guó)授權(quán)代理,為用戶(hù)提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。如對(duì)產(chǎn)品感興趣歡迎撥打西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006或登錄網(wǎng)站www.rmb365.cn了解更多信息。 更多>

SeraCare?KPL免疫學(xué)輔助試劑

西美杰代理的LGC·SeraCare·KPL(以下簡(jiǎn)稱(chēng)KPL)是全球知名親和純化商業(yè)二抗和底物顯色系統(tǒng)生產(chǎn)商,擁有40余年的產(chǎn)品研發(fā)經(jīng)驗(yàn),獲得ISO 13485質(zhì)量體系認(rèn)證,產(chǎn)品批間穩(wěn)定,品質(zhì)可靠,深受廣大診斷企業(yè)喜愛(ài)和好評(píng)。KPL旗下產(chǎn)品線(xiàn)包含高性?xún)r(jià)比二抗、底物顯色試劑及免疫學(xué)輔助試劑等,廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)研究、診斷試劑開(kāi)發(fā)及臨床檢測(cè)等領(lǐng)域。本文將重點(diǎn)介紹KPL的免疫學(xué)輔助試劑產(chǎn)品。免疫學(xué)檢測(cè)在醫(yī)學(xué)、生物研究等多個(gè)領(lǐng)域有著極其重要的應(yīng)用,例如疾病診斷、疫苗研發(fā)以及藥物篩選等。準(zhǔn)確且可靠的檢測(cè)結(jié)果對(duì)于科學(xué)研究和臨床實(shí)踐來(lái)說(shuō)至關(guān)重要。免疫學(xué)輔助試劑在免疫檢測(cè)過(guò)程中發(fā)揮著不可或缺的作用,它們就像精密儀器的潤(rùn)滑劑和穩(wěn)定劑一樣,保障了整個(gè)檢測(cè)過(guò)程的順利、高效與準(zhǔn)確。緩沖液在免疫學(xué)檢測(cè)中起到維持穩(wěn)定的作用,如維持適宜的pH值范圍,確??乖贵w反應(yīng)等生物化學(xué)過(guò)程在穩(wěn)定的環(huán)境下進(jìn)行,防止因pH值波動(dòng)導(dǎo)致的檢測(cè)結(jié)果偏差。KPL品牌緩沖液因其獨(dú)特配方,確保緩沖液的穩(wěn)定性,且與多種檢測(cè)系統(tǒng)和試劑兼容。 品名 貨號(hào) 規(guī)格 描述 10X Phosphate Buffered Saline (PBS) 5460-0022 5460-0023 1 Bottle x 1.0 L 1 Bottle x 5 L 10倍濃縮液,適用于大部分免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)。 10X Phosphate Buffered Saline with Tween 20(PBST) 5460-0026 5460-0027 1 Bottle x 200 mL 1 Bottle x 1.0 L 10倍濃縮液,吐溫20可減少非特異性結(jié)合和蛋白質(zhì)間相互作用。 10X Dulbecco's PBS with Tween 20 (D-PBST) 5460-0033 5460-0034 1 Bottle x 200 mL 1Bottle x 1.0 L 10倍濃縮液,改良配方,緩沖液中沒(méi)有鎂鹽或鈣鹽。 封閉液在免疫學(xué)檢測(cè)中通過(guò)預(yù)先結(jié)合檢測(cè)系統(tǒng)中的空白位點(diǎn)(如ELISA板孔中的空白蛋白結(jié)合位點(diǎn)),阻止非特異性蛋白的吸附,降低非特異性結(jié)果帶來(lái)的假陽(yáng)性結(jié)果,確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。常見(jiàn)的封閉液成分有非蛋白類(lèi)封閉劑和蛋白類(lèi)封閉劑。KPL品牌封閉劑穩(wěn)定性高,不易受溫度、pH值等實(shí)驗(yàn)條件變化的影響,即使在復(fù)雜的檢測(cè)樣本或高濃度蛋白環(huán)境中,也能有效阻斷非特異性結(jié)合,顯著提高檢測(cè)的準(zhǔn)確率。 品名 貨號(hào) 規(guī)格 描述 10% BSA Diluent/ Blocking Solution 5140-0006 5140-0008 2 Bottles x 100 mL 1 Bottle x 1.0 L 10%BSA封閉液/稀釋液,避免大量交叉反應(yīng),與大部分檢測(cè)系統(tǒng)兼容,適用于ELISA、WB、IHC等應(yīng)用。 Milk Diluent/Blocking Concentrate Kit 5140-0011 2 Bottles x 100 mL 2%脫脂牛奶封閉液/稀釋劑,大大降低非特異性結(jié)果,適用于ELISA、WB等應(yīng)用。 洗滌液在免疫檢測(cè)過(guò)程中用于去除未結(jié)合的抗原、抗體、非特異性結(jié)合的蛋白等雜質(zhì),減少背景干擾,提高檢測(cè)信號(hào)與背景的對(duì)比度,從而提升檢測(cè)的靈敏度和特異性。洗滌液中的表面活性劑和鹽類(lèi)協(xié)同作用,實(shí)現(xiàn)有效的洗滌效果,同時(shí)避免對(duì)目標(biāo)檢測(cè)物質(zhì)造成損傷。KPL洗滌劑的獨(dú)特配方,通過(guò)優(yōu)化表面活性劑的濃度和種類(lèi),能夠在溫和的條件下高效地去除雜質(zhì),顯著降低檢測(cè)結(jié)果的背景噪音。KPL洗滌液提供濃縮型,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求快速配制所需濃度。 品名 貨號(hào) 規(guī)格 描述 Wash Solution Concentrate Kit(20X) 5150-0008 5150-0011 4 Bottles x 200 mL 1 Bottle x 1.0 L 20倍濃縮液,包含咪唑緩沖液和吐溫20,適用于ELISA,WB和IHC等應(yīng)用。 終止液在免疫檢測(cè)過(guò)程中通過(guò)改變反應(yīng)條件(如改變pH值)來(lái)終止酶促反應(yīng),確保反應(yīng)產(chǎn)物的生成在某一特定時(shí)刻被中斷,以便準(zhǔn)確測(cè)量反應(yīng)物的量,從而推算待測(cè)物質(zhì)的濃度。KPL終止液能在短時(shí)間迅速終止反應(yīng),并保持在穩(wěn)定狀態(tài),從而保證檢測(cè)結(jié)果的可靠性。 品名 貨號(hào) 規(guī)格 描述 ABTS® Peroxidase Stop Solution 5150-0017 2 Bottles x 100 mL 專(zhuān)利配方,適用于A(yíng)BTS底物體系。 TMBBlueSTOPTM Solution 5150-0022 5150-0024 4Bottles x 100 mL 1Bottle x 1.0 L 即用型專(zhuān)利配方,適用于TMB底物體系,不同于傳統(tǒng)酸終止液,,終止后藍(lán)色持久穩(wěn)定。 APStop?Solution (10X) 5150-0026 2Bottles x 100 mL 專(zhuān)利配方,適用堿性磷酸酶及pNPP檢測(cè)體系。 穩(wěn)定劑是為了保持酶標(biāo)記物(如辣根過(guò)氧化物酶HRP或堿性磷酸酶AP)的穩(wěn)定性和活性,從而確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。常用的穩(wěn)定劑有甘油、BSA、二乙醇胺及其他商業(yè)化產(chǎn)品。KPL穩(wěn)定劑為即用型溶液,廣泛用于ELISA、蛋白質(zhì)印跡(WB)和免疫組織化學(xué)(IHC)等需要酶標(biāo)記物的應(yīng)用。 品名 貨號(hào) 規(guī)格 描述 HRP Stabilizer 5290-0005 1 Bottles x 200 mL HRP穩(wěn)定劑,用于HRP標(biāo)記物的稀釋、保存,比BSA、50%甘油等的保存效果更好,更穩(wěn)定,保存時(shí)間更久,即用型溶液。 AP Stabilizer 5290-0007 1 Bottles x 200 mL AP穩(wěn)定劑,用于A(yíng)P標(biāo)記物的稀釋、保存,比BSA、50%甘油等的保存效果更好,更穩(wěn)定,保存時(shí)間更久,即用型溶液。 增強(qiáng)劑是一種用來(lái)提高檢測(cè)靈敏度和信號(hào)強(qiáng)度的試劑,在WB實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,可增強(qiáng)與膜上目標(biāo)蛋白結(jié)合的抗體信號(hào),有助于改善低質(zhì)量和低親和力抗體的信噪比,減少背景噪音,使WB結(jié)果更清晰。 品名 貨號(hào) 規(guī)格 描述 TMB Membrane Enhancer 5420-0026 1Bottles x 40 mL 增強(qiáng)信號(hào)作用,建議與雙組份TMB底物(貨號(hào):5120-0047)配合使用。 抗熒光淬滅封片劑通常在免疫熒光(IF)、熒光原位雜交(FISH)、流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry)等免疫實(shí)驗(yàn)中用到,用于保護(hù)樣本不受外界環(huán)境干擾,減少光漂白和提高信號(hào)的穩(wěn)定性等作用。KPL的熒光封片劑是基于免疫熒光顯微鏡的甘油基溶液,其獨(dú)特的配方中含有抑制劑,能夠顯著減緩熒光素、羅丹明等熒光標(biāo)記物的光漂白過(guò)程,也可用作熒光標(biāo)記結(jié)合物的稀釋劑。 品名 貨號(hào) 規(guī)格 描述 Fluorescent Mounting Media 5570-0005 1 Bottles x 15 mL 推薦用于免疫組織化學(xué)和熒光原位雜交實(shí)驗(yàn)中,可用于多種細(xì)胞載玻片制備。 KPL(Kinetic Plasmonics Laboratories)是一家在生物科學(xué)領(lǐng)域具有深厚歷史和卓越聲譽(yù)的公司。作為世界上較早實(shí)現(xiàn)親和純化二抗商業(yè)化的生物公司之一,KPL憑借其在該領(lǐng)域的先驅(qū)地位奠定了堅(jiān)實(shí)的發(fā)展基礎(chǔ)。此外,KPL也是世界上較大的二抗和底物顯色系統(tǒng)生產(chǎn)商,擁有近40年的產(chǎn)品研發(fā)經(jīng)驗(yàn),積累了豐富的專(zhuān)業(yè)知識(shí)和技術(shù)實(shí)力。公司通過(guò)ISO13485質(zhì)量體系認(rèn)證,確保所有產(chǎn)品的批間差小,品質(zhì)可靠。KPL的產(chǎn)品以高純度、高靈敏度和高信噪比(信號(hào)強(qiáng)、背景低)為特點(diǎn),深受科研人員和診斷企業(yè)的信賴(lài)。2013年,KPL被體外診斷試劑供應(yīng)商SeraCare收購(gòu),進(jìn)一步鞏固了其在行業(yè)內(nèi)的領(lǐng)先地位。SeraCare成立于1984年,是全球體外診斷制造商和臨床實(shí)驗(yàn)室的主要合作伙伴,2018年成為L(zhǎng)GC集團(tuán)的一部分。北京西美杰作為L(zhǎng)GC·Seracare·KPL品牌的中國(guó)區(qū)總代理,致力于KPL產(chǎn)品的中國(guó)推廣,為國(guó)內(nèi)的廣大科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和專(zhuān)業(yè)的服務(wù)。 更多>

SeraCare?KPL高性?xún)r(jià)比WB底物

西美杰代理的LGC·SeraCare·KPL(以下簡(jiǎn)稱(chēng)KPL)是國(guó)際知名親和純化商業(yè)二抗和底物顯色系統(tǒng)生產(chǎn)商,具備逾40年的產(chǎn)品研發(fā)與生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn),并已通過(guò)ISO 13485質(zhì)量體系認(rèn)證。其產(chǎn)品批間一致性高、質(zhì)量穩(wěn)定可靠,在診斷試劑行業(yè)中獲得廣泛認(rèn)可與信賴(lài)。KPL旗下產(chǎn)品線(xiàn)包含高性?xún)r(jià)比二抗、底物顯色試劑及免疫輔助試劑等,廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)研究、診斷試劑開(kāi)發(fā)及臨床檢測(cè)等領(lǐng)域。KPL品牌高性?xún)r(jià)比的底物與通用型試劑可廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、免疫印跡(Western Blot, WB)、免疫組化(IHC)以及酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)(ELISpot)等多種實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。本文將重點(diǎn)介紹KPL品牌中適用于Western blotting技術(shù)的高性?xún)r(jià)比底物系列產(chǎn)品。 Western blotting技術(shù) Western Blot技術(shù)是一種用于檢測(cè)特定蛋白質(zhì)的免疫印跡技術(shù),是免疫檢測(cè)領(lǐng)域中最流行的方法之一。它基于蛋白質(zhì)的分子量分離和特異性抗體識(shí)別,通過(guò)電泳分離蛋白質(zhì)后,將其轉(zhuǎn)移到固相膜上,再利用特異性抗體進(jìn)行檢測(cè)。在Western Blot實(shí)驗(yàn)中,信號(hào)檢測(cè)是關(guān)鍵步驟,用于可視化和定量目標(biāo)蛋白。過(guò)去,比色檢測(cè)和低靈敏度化學(xué)發(fā)光檢測(cè)推動(dòng)了研究的擴(kuò)展。然而,隨著對(duì)檢測(cè)靈敏度要求的不斷提高以及成像分析系統(tǒng)的進(jìn)步,化學(xué)發(fā)光分子設(shè)計(jì)也取得了顯著發(fā)展,實(shí)現(xiàn)了更高靈敏度的檢測(cè)能力。在Western Blot實(shí)驗(yàn)體系中,高質(zhì)量底物對(duì)實(shí)現(xiàn)高靈敏度與低背景值至關(guān)重要。KPL提供的生色底物與化學(xué)發(fā)光底物,以其卓越的性能和可靠的質(zhì)量,成為Western Blot實(shí)驗(yàn)體系中的核心組成部分,助力科研人員獲得更理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果?;瘜W(xué)發(fā)光底物系列產(chǎn)品 化學(xué)發(fā)光法是檢測(cè)微量蛋白質(zhì)的最佳選擇,其原理是化學(xué)發(fā)光底物在被抗體標(biāo)記的酶(如HRP或AP)催化時(shí)發(fā)光。KPL的LumiGLO®系列是基于魯米諾的HRP底物,提供從常規(guī)到超高靈敏度的完整檢測(cè)方案;KPL的PhosphaGLO?系列則是基于二氧雜環(huán)丁烷的AP底物,兼具高靈敏與操作靈活性。兩者均適用于Western Blot及ELISA應(yīng)用。 LumiGLO Reserve? &LumiGLO® 化學(xué)發(fā)光底物 LumiGLO Reserve?和 LumiGLO®均是基于魯米諾的化學(xué)發(fā)光底物,專(zhuān)為高靈敏度檢測(cè)設(shè)計(jì)。LumiGLO Reserve?靈敏度較LumiGLO®及其他同類(lèi)產(chǎn)品提升超過(guò)20倍,尤其適用于低豐度蛋白或珍貴樣本的檢測(cè);其發(fā)光信號(hào)可持續(xù)4至8小時(shí),最強(qiáng)信號(hào)出現(xiàn)在反應(yīng)后第一小時(shí)內(nèi),發(fā)光強(qiáng)度顯著,更易被化學(xué)發(fā)光成像儀清晰捕捉。該產(chǎn)品為穩(wěn)定的雙組分溶液,按1:2比例配制即用,并提供三種規(guī)格及配套濃縮型KPL洗滌液,進(jìn)一步提升實(shí)驗(yàn)便利性。而 LumiGLO®同樣以雙組分形式提供,使用時(shí)等體積混合即可,操作簡(jiǎn)便,在Western Blot及ELISA檢測(cè)中比顯色底物更靈敏,背景低,與HRP反應(yīng)后5分鐘內(nèi)達(dá)到最大發(fā)光強(qiáng)度,信號(hào)可持續(xù)1至2小時(shí),并支持免疫印跡膜的多次剝離與重新探測(cè),線(xiàn)性動(dòng)態(tài)范圍優(yōu)于多數(shù)同類(lèi)產(chǎn)品,廣泛適用于多種蛋白檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。兩款產(chǎn)品的檢測(cè)結(jié)果均可通過(guò)X光膠片或化學(xué)發(fā)光成像儀進(jìn)行永久記錄。 品名 貨號(hào) 規(guī)格 反應(yīng)酶 信號(hào)類(lèi)型 靈敏度 LumiGLO Reserve? ChemiluminescentSubstrate 5430-0050 5430-0051 5430-0049 600 cm2 1000 cm2 2400 cm2 HRP 化學(xué)發(fā)光 10-15-10-12 LumiGLO®Chemiluminescent Substrate 5430-00425430-00405430-0041 60 mL 240 mL 720 mL HRP 化學(xué)發(fā)光 10-12 PhosphaGLO Reserve?AP&PhosphaGLO? 化學(xué)發(fā)光底物 PhosphaGLO Reserve?與 PhosphaGLO?均為基于二氧雜環(huán)丁烷的即用型單組分化學(xué)發(fā)光底物,專(zhuān)為堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記系統(tǒng)優(yōu)化設(shè)計(jì)。PhosphaGLO Reserve?具備飛克級(jí)超高靈敏度,可精準(zhǔn)檢測(cè)低豐度蛋白,顯著減少珍貴樣本用量,并提供卓越的信號(hào)強(qiáng)度和長(zhǎng)達(dá)五天的穩(wěn)定發(fā)光,支持多次曝光或重復(fù)讀數(shù),其信號(hào)強(qiáng)度顯著優(yōu)于傳統(tǒng)顯色底物及其他化學(xué)發(fā)光產(chǎn)品;而PhosphaGLO?可穩(wěn)定檢測(cè)皮克級(jí)別蛋白,無(wú)需額外封閉步驟,操作簡(jiǎn)便,發(fā)光信號(hào)可持續(xù)長(zhǎng)達(dá)五天,并在4°C條件下穩(wěn)定保存兩年。兩款產(chǎn)品均兼容 X 光膠片和化學(xué)發(fā)光成像儀等多種檢測(cè)設(shè)備,為高靈敏度蛋白質(zhì)檢測(cè)提供靈活、可靠的解決方案。 品名 貨號(hào) 規(guī)格 反應(yīng)酶 信號(hào)類(lèi)型 靈敏度 PhosphaGLO Reserve? AP Substrate 5430-00525430-0053 30 mL 100 mL AP 化學(xué)發(fā)光 10-15 PhosphaGLO? AP Substrate 5430-00545430-0055 30 mL 100 mL AP 化學(xué)發(fā)光 10-12 顯色底物系列產(chǎn)品 顯色底物利用酶促反應(yīng)產(chǎn)生可見(jiàn)的最終產(chǎn)物,適用于目標(biāo)蛋白含量較高的檢測(cè)場(chǎng)景。這類(lèi)底物的優(yōu)勢(shì)在于其結(jié)果可以直接在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上觀(guān)察,并通過(guò)拍照長(zhǎng)期保存,無(wú)需暗室或?qū)I(yè)成像系統(tǒng)。KPL提供的顯色底物針對(duì)HRP(辣根過(guò)氧化物酶)和AP(堿性磷酸酶)檢測(cè)進(jìn)行了優(yōu)化,具備多種靈敏度級(jí)別,確保高穩(wěn)定性和批間一致性。 TMB 1 Membrane Peroxidase Substrate底物系列 TMB膜過(guò)氧化物酶底物是一種高靈敏度的顯色底物,專(zhuān)為辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)設(shè)計(jì),能夠在HRP標(biāo)記位點(diǎn)形成清晰的深藍(lán)色沉淀。這種底物提供了兩種形式:TMB 1-Component Membrane Peroxidase Substrate單組分即用型,使用方便,無(wú)需額外配制;以及TMB Membrane Peroxidase Substrate System(3-C)三組分系統(tǒng),通過(guò)省略增強(qiáng)劑,可調(diào)整為適用于ELISA的可溶性底物系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)一物多用。這兩種形式都具有出色的靈敏度和應(yīng)用靈活性,適用于Western Blot、Dot Blot以及ELISA等多種檢測(cè)方法。其高靈敏度、操作簡(jiǎn)便、多功能性和高穩(wěn)定性,使其成為膜檢測(cè)中最靈敏的顯色解決方案之一,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和重復(fù)性。 品名 貨號(hào) 規(guī)格 反應(yīng)酶 信號(hào)類(lèi)型 靈敏度 TMB 1-ComponentMembrane Peroxidase Substrate 5420-00295420-00275420-0028 100 mL 200 mL 1000 mL HRP 顯色 10-12 TMB MembranePeroxidase Substrate System(3-C) 5420-0025 440 mL HRP 顯色 10-12 BCIP/NBT Phosphatase Substrate 底物系列 BCIP/NBT磷酸酶底物是專(zhuān)為與堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的偶聯(lián)物配合使用的高效顯色檢測(cè)底物,可產(chǎn)生清晰的紫色沉淀?xiàng)l帶,同時(shí)保持極低的背景染色。該底物提供兩種形式:經(jīng)典的三組分系統(tǒng)BCIP/NBT Phosphatase Substrate System(3-C)和更便捷的單組分BCIP/NBT 1-Component Phosphatase Substrate即用型溶液。兩種形式均適用于蛋白印跡和ELISpot實(shí)驗(yàn),滿(mǎn)足不同實(shí)驗(yàn)需求,確保檢測(cè)結(jié)果的高靈敏度和可靠性。 品名 貨號(hào) 規(guī)格 反應(yīng)酶 信號(hào)類(lèi)型 靈敏度 BCIP/NBT1-Component Phosphatase Substrate 5420-0038 5420-00335420-00365420-0037 100 mL 6x100 mL 1000 mL 5000 mL AP 顯色 10-12-10-9 BCIP/NBTPhosphatase Substrate System(3-C) 5420-0030 300 mL AP 顯色 10-12-10-9 關(guān)于LGC·Seracare·KPL品牌 KPL(Kinetic Plasmonics Laboratories)是一家在生物科學(xué)領(lǐng)域具有深厚歷史和卓越聲譽(yù)的公司。作為世界上較早實(shí)現(xiàn)親和純化二抗商業(yè)化的生物公司之一,KPL憑借其在該領(lǐng)域的先驅(qū)地位奠定了堅(jiān)實(shí)的發(fā)展基礎(chǔ)。此外,KPL也是世界上較大的二抗和底物顯色系統(tǒng)生產(chǎn)商,擁有近40年的產(chǎn)品研發(fā)經(jīng)驗(yàn),積累了豐富的專(zhuān)業(yè)知識(shí)和技術(shù)實(shí)力。公司通過(guò)ISO13485質(zhì)量體系認(rèn)證,確保所有產(chǎn)品的批間差小,品質(zhì)可靠。KPL的產(chǎn)品以高純度、高靈敏度和高信噪比(信號(hào)強(qiáng)、背景低)為特點(diǎn),深受科研人員和診斷企業(yè)的信賴(lài)。2013年,KPL被體外診斷試劑供應(yīng)商SeraCare收購(gòu),進(jìn)一步鞏固了其在行業(yè)內(nèi)的領(lǐng)先地位。SeraCare成立于1984年,是全球體外診斷制造商和臨床實(shí)驗(yàn)室的主要合作伙伴,2018年成為L(zhǎng)GC集團(tuán)的一部分。北京西美杰作為L(zhǎng)GC·Seracare·KPL品牌的中國(guó)區(qū)總代理,致力于KPL優(yōu)秀產(chǎn)品的中國(guó)推廣,為國(guó)內(nèi)的廣大科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和專(zhuān)業(yè)的服務(wù)。 更多>

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北京西美杰科技有限公司(Beijing XMJ Scientific Co.,Ltd,以下簡(jiǎn)稱(chēng)西美杰)于2006年成立,由留美歸國(guó)生物領(lǐng)域?qū)I(yè)人士創(chuàng)辦。西美杰堅(jiān)持自己的經(jīng)營(yíng)理念,勤奮踏實(shí)地整合全球產(chǎn)品資源與技術(shù)資源,為高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生產(chǎn)企業(yè)提供一站式產(chǎn)品服務(wù)方案,幫助科研及企業(yè)單位縮短科研時(shí)間... 更多>

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